Культивирование и индикация вирусов
Вирусы
культивируют в организме лабораторных
животных, в развивающихся куриных эмбрионах и
культурах клеток (тканей).
Индикацию вирусов проводят
на основе следующих феноменов: цитопатогенного
действия (ЦПД) вирусов, образования
внутриклеточных включений, образования
“бляшек”, реакции гемагглютинации,
гемадсорбции или “цветной” реакции. |
ЦПД - видимые под
микроскопом морфологические изменения клеток
(вплоть до их отторжения от стекла), возникающие в
результате внутриклеточной репродукции вирусов.
|
 |
 |
Культура клеток |
ЦПД вируса |
|
Включения — скопление
вирионов или отдельных их компонентов в
цитоплазме или ядре клеток, выявляемые под
микроскопом при специальном окрашивании. Вирус
натуральной оспы образует цитоплазматические
включения - тельца Гварниери; вирусы герпеса и
аденовирусы - внутриядерные включения. |

|
Бляшки, или “негативные”
колонии — ограниченные участки
разрушенных вирусами клеток, культивируемых на
питательной среде под агаровым покрытием,
видимые как светлые пятна на фоне окрашенных
живых клеток. Один вирион образует потомство в
виде одной бляшки. “Негативные” колонии разных
вирусов отличаются по размеру, форме, поэтому
метод бляшек используют для дифференциации
вирусов, а также для определения их концентрации. |

|
РГА основана на способности
некоторых вирусов вызывать агглютинацию
(склеивание) эритроцитов за счет вирусных
гликопротеиновых шипов – гемагглютининов. |
 |
Реакция гемадсорбции —
способность культур клеток, инфицированных
вирусами, адсорбировать на своей поверхности
эритроциты. |

|
“Цветная” реакция
оценивается по изменению цвета индикатора,
находящегося в питательной среде
культивирования. Если вирусы не размножаются в
культуре клеток, то живые клетки в процессе
метаболизма выделяют кислые продукты, что ведет
к изменению рН среды и соответственно цвета
индикатора. При продукции вирусов нормальный
метаболизм клеток нарушается (клетки гибнут), и
среда сохраняет свой первоначальный цвет. |
|
|